بررسی اثر مهاری نانوذرات icd-85 (پپتیدهای مشتق از سموم جانوری) روی سلول سرطانی hela

چکیده بسیاری از داروهای ضد سرطان دارای شاخص درمانی بسیار باریکی هستند و درنتیجه موجب ایجاد عوارض جانبی و تاثیر بر بافت های غیرسرطانی می شوند. توسعه نانوحامل های دارویی بر پایه نانوذرات پلیمری به عنوان یک رویکرد امید بخش برای کاستن از این مشکلات مطرح می باشد. در مطالعات قبلی، ثابت شد که ترکیب icd-85 (پپتیدهای مشتق از سموم جانوری) به عنوان یک ترکیب ضد سرطانی بر روی سلول های سرطانی mda-mb 231و hl-60اثر سایتوتوکسیک دارد. در این مطالعه اثر سایتوتوکسیک فرم انکپسوله icd-85 محصور در نانوذرات سدیم آلژینات و فرم آزاد icd-85 بر روی سلول های سرطانی hela و سلول های نرمال mrc-5 و lk مورد مقایسه و تحقیق قرار گرفت. تاثیر فرم های آزاد و انکپسوله icd-85 بر رشد سلول های سرطانی hela و سلول های نرمال mrc-5 و lk با سنجش mtt در زمان های مختلف (24، 48 و72 ساعت) بررسی گردید. اثر نکروتیک با اندازه گیری آنزیم لاکتات دهیدروژناز تعیین گردید. آپوپتوز ناشی از فرم های آزاد و انکپسوله icd-85 با استفاده از کیت کالریمتری کاسپاز 8 بررسی شد. تغییرات مورفولوژی سلول های تیمار شده توسط میکروسکوپ اینورت مقایسه شد. نتایج حاصل از تست mttنشان داد که فرم انکپسوله icd-85 موجب افزایش سایتوتوکسیسیته در برابر سلول های سرطانی hela شده و میزان ic50 در مدت زمان 72 ساعت از 25±2.9?g/ml در فرم آزاد icd-85 به 15.5±2.4?g/ml در فرم انکپسوله icd-85 کاهش یافته است. همچنین نتایج ثابت نمود که مکانیسم القاء آپوپتوز توسط فرم های آزاد و انکپسوله icd-85 بر روی سلول های hela از طریق فعال شدن کاسپاز 8 هدایت می شود. آنالیز نتایج سنجش کاسپاز 8 نشان داد که میزان القای آپوپتوز فرم انکپسوله icd-85 در مقایسه با فرم آزاد دو برابر بیشتر است. نتایج تست mtt در سلول های نرمال نشان داد که سایتوتوکسیسیته فرم انکپسوله icd-85 در مقایسه با فرم آزاد آن در غلظت های مشابه و در سلول های یکسان کاهش یافته است. میزان ic10 در سلول های نرمال lk از 9±2.7?g/ml در فرم آزاد به 52±4.3?g/ml در فرم انکپسوله icd-85 افزایش یافت. نتایج فعالیت آنزیم لاکتات دهیدروژناز نشان داد که فرم آزاد icd-85 به صورت وابسته به غلظت بر سلول های نرمال mrc-5 و lk اثر نکروتیک دارد و این در حالی است که اثر نکروتیک در فرم انکپسوله icd-85 به صورت معناداری کاهش یافته است. علاوه بر این، سلول های نرمال تحت تیمار با فرم انکپسوله icd-85 در مقایسه با گروه کنترل تغییرات مورفولوژیکی معنادار نشان ندادند. بر اساس نتایج بدست آمده در این تحقیق می توان گفت که انکپسوله کردن ترکیب icd-85 در نانوذرات سدیم آلژینات موجب افزایش خاصیت مهاری آن بر سلول های سرطانی می شود و در عین حال سبب کاهش معنادار اثرات نکروتیک بر روی سلول های نرمال نیز می گردد.